ELISA實驗中的ELISA板材質(zhì)及優(yōu)勢特點

可用作ELISA板的物質(zhì)很多，常用的是聚苯乙烯和聚氯乙烯，它們具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來的免疫活性。作為塑料，可制成各種形式。在ELISA測定過程中，它們作為載體和容器，不參與化學(xué)反應(yīng)。加之它們的價格低廉，所以被普遍采用。專用于ELISA測定的產(chǎn)品也稱為ELISA板，國際通用的標準板形是8×12的96孔式。

良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之間和同一板各孔之間性能相近。

①聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別，各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此每一批號的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能。常用的檢查方法為：以一定濃度的人IgG（一般為 10ng/ml）包被 ELISA 板各孔后，每孔內(nèi)加入適當稀釋的酶標抗人IgG抗體，保溫后洗滌，加底物顯色，終止酶反應(yīng)后分別測每孔溶液的吸光度。控制反應(yīng)條件，使各讀數(shù)在0.8左右。計算所有讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與平均讀數(shù)之差應(yīng)小于10％。

②另一中是與聚苯乙烯類似的塑料聚氯乙烯。作為ELISA固相載體，聚氯乙烯板的特點為質(zhì)軟板薄，可切割，價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值有時也略高。

為比較不同固相在某一ELISA測定中的優(yōu)劣，可用以下方法加以檢驗：用其它免疫學(xué)測定方法選出一個典型的陽性標本和一個典型的陰性標本。將它們分別進行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預(yù)定的 ELISA 操作步驟進行測定，然后比較測定結(jié)果。在哪一種載體上陽性結(jié)果與陰性結(jié)果判別最大，這種載體就是這一 ELISA測定的最合適的固相載體。

ELISA 板的特點是可以同時進行大量標本的檢測，并可在特定的比色計上迅速讀出結(jié)果?，F(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量反應(yīng)板型的 ELISA 檢測，包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟，對操作的標準化極為有利。