酶水解 - 高效液相色譜熒光法檢測花生色氨酸的含量

花生是我國重要的油料和經(jīng)濟作物，種植面積約 480 萬公頃，總產(chǎn)量約 1800 萬噸。花生籽仁不僅富含多不飽和脂肪酸、蛋白質(zhì)、碳水化合物、白藜蘆醇、植物甾醇和維生素，同時含有色氨酸等功能性氨基酸成分。

色氨酸（Tryptophan），分子式為C11H12N2O2，分子量為204.23 Da，是一種含有芳香環(huán)結(jié)構(gòu)的人體必需氨基酸。色氨酸無法在人體內(nèi)自主合成，只能通過食物攝取，能夠促進(jìn)人體生長發(fā)育，提升免疫力，調(diào)節(jié)晝夜節(jié)律，改善睡眠質(zhì)量，對人體具有重要的生理活性功能。

色氨酸作為人體必需的氨基酸之一，參與多種生理過程，如蛋白質(zhì)合成、神經(jīng)遞質(zhì)合成等，對維持人體正常生理功能至關(guān)重要。花生是一種營養(yǎng)豐富的食品，富含蛋白質(zhì)、油脂、維生素等多種營養(yǎng)成分，其中色氨酸的含量是評估花生營養(yǎng)價值的重要指標(biāo)之一。

目前，色氨酸的檢測方法主要包括分光光度法、氨基酸分析儀法和高效液相色譜法等。分光光度法操作簡便，但靈敏度較低，且易受其他物質(zhì)干擾；氨基酸分析儀法雖然準(zhǔn)確性高，但儀器成本昂貴，分析費用較高；高效液相色譜法則以其高分離效率和快速分析等優(yōu)勢，在氨基酸檢測中得到了廣泛應(yīng)用。然而，花生中的色氨酸大多以蛋白質(zhì)結(jié)合態(tài)存在，直接采用高效液相色譜法難以準(zhǔn)確測定其含量，因此需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理。酶水解法是一種溫和的樣品預(yù)處理方法，能夠在不破壞色氨酸結(jié)構(gòu)的前提下，將蛋白質(zhì)結(jié)合態(tài)的色氨酸釋放出來。結(jié)合高效液相色譜熒光法，有望實現(xiàn)對花生中色氨酸含量的精確測定。

酶水解主要應(yīng)用于大豆、葵花籽、南瓜、小米、紫菜等食用 農(nóng) 產(chǎn) 品 ，食 品 安 全 國 家 標(biāo) 準(zhǔn)《GB 5009. 294- 2023 食品中色氨酸的測定》采用酶水解-液相色譜 法測定嬰幼兒配方食品、特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品中色氨酸含量 。研究表明色氨酸廣泛存在于糧油作物產(chǎn)品，針對色氨酸的分析方法逐漸成為農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)營養(yǎng)功能成分研究熱點。

采用酶水解-高效液相色譜熒光法分析花生色氨酸含量，優(yōu)化了水解酶種類、酶水解條件和色譜分離參數(shù)，前處理步驟簡單、水解條件溫和、效率高，能夠滿足花生等油料色氨酸精準(zhǔn)檢測。