脫落酸ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)程序如下

　　脫落酸ELISA檢測(cè)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），往預(yù)先包被激素脫落酸（ABA）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的激素脫落酸（ABA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

　　
 

　　要選個(gè)合適的脫落酸ELISA檢測(cè)試劑盒主要看以下幾點(diǎn)：

　　

　　1、高靈敏度

　　

　　2、特異性強(qiáng)

　　

　　3、重復(fù)性好

　　

　　4、經(jīng)濟(jì)

　　

　　5、方便

　　

　　6、快速

　　

　　脫落酸ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)程序如下：

　　

　　1、建立標(biāo)準(zhǔn)曲線：設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔8孔，每孔中各加入樣品稀釋液100ul，第一孔加標(biāo)準(zhǔn)品100ul，混勻后用加樣器吸出100ul，移至第二孔。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋至第六孔，最后，從第六孔中吸出100ul棄去。第七孔為空白對(duì)照，第八孔為零孔。

　　

　　2、加樣：待測(cè)品孔每孔各加入待測(cè)樣品100ul混勻。

　　

　　3、將反應(yīng)板充分混勻后粘上封板紙置37攝氏度120分鐘。

　　

　　4、洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。

　　

　　5、每孔(除零孔)加第一抗體工作液50ul，置37℃60分鐘。

　　

　　6、洗板：同前。

　　

　　7、每孔(除零孔)加酶標(biāo)抗體工作液100ul(兩滴)，將反應(yīng)板置37oC60分鐘。

　　

　　8、洗板：同前。

　　

　　9、每孔加入底物液A、B各一滴，置37攝氏度避光反應(yīng)15分鐘。

　　

　　10、每孔加入1滴終止液混勻。

　　

　　11、在450nm處測(cè)吸光值。